全站搜索
产品搜索
 
 
文章正文
酶联免疫法
作者:管理员    发布于:2014-09-04 06:28:46    文字:【】【】【
摘要:酶联免疫法简称ELISA

酶联免疫法简称ELISA,是酶免 疫测定技术中应用最广的技术。其基本 方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 聚苯乙烯微量反应板 表面,使酶标 记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤 法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双 抗体夹心法和间接法,前者用 于检测大分子抗原,后者用 于测定特异抗体。 

自从EngvallPerlman1971)首次报 道建立酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays, ELISA)以来,由于ELISA有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,使其得 到迅速的发展和广泛应用 。尽管早期的ELISA由于特 异性不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着 方法的不断改进、材料的不断更新,尤其是 采用基因工程方法制备包被抗原,采用针 对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断ELISA试验,都大大提高了ELISA的特异性,加之电 脑化程度极高的ELISA检测仪的使用,使ELISA更为简 便实用和标准化,从而使 其成为最广泛应用的检测方法之一。

基本原理:

①使抗原 或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。

②使抗原 或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶 标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其 中的抗体或抗原)和酶标 抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤 的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结 合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被 酶催化变为有色产物,产物的 量与标本中受检物质的量直接相关,故可根 据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶 的催化频率很高,故可极 大地放大反应效果,从而使 测定方法达到很高的敏感度。

ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:

①固相的抗原或抗体

②酶标记的抗原或抗体

③酶作用的底物。根据试 剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计 出各种不同类型的检测方法。

 
友情链接:    急速炸金花_免费下载   急速炸金花-平台   途游棋牌游戏-首页   街机森林舞会-网易娱乐   欢乐牛牛_免费下载